художественная ковка, заборы с деревянными накладками и коваными узорами
Первое впечатление и на гостей, и на тех, кто проходит мимо вашего дома, производит забор с воротами. Он окружает территорию частного участка, поэтому является своего рода визитной карточкой тех, кто живет в этом доме. По тому, какие ворота выбрали хозяева, можно судить и об их вкусе, и о материальном благополучии. Самыми красивыми не зря считают ворота с элементами ковки, ведь их можно декорировать самыми разнообразными узорами, проявив в полной мере свою фантазию.
Особенности
Главная особенность ворот с элементами ковки – это именно их привлекательный внешний вид.
Художественная ковка – это процесс, который требует от мастера не только огромного количества потраченного времени, но и богатой фантазии. Именно поэтому внешний вид ворот и заборов так высоко ценится. Чаще всего – это эксклюзивная работа, которая выполняется по индивидуальным эскизам.
Выглядят такие ворота всегда привлекательно благодаря тому, что кованные элементы отлично смотрятся на фоне всех других материалов.
Художественная ковка может прекрасно дополнить конструкции из профнастила, металлические и кирпичные заборы. Такие ворота станут украшением участка в любом из стилей, будь то изысканный прованс, сдержанный модерн или эпатажный рустик.Важно также заметить, что несмотря на свой хрупкий и изящный внешний вид, такие изделия на самом деле получаются довольно прочными. Конструкции не страшны ни плохая погода, ни время. Для того, чтобы новые ворота точно прослужили вам не один год, следует обработать их защитным слоем специального состава или прикрыть сверху аккуратным козырьком. В некоторых случаях красоту кованных ворот скрывают дополнительным слоем профнастила, что позволяет любоваться конструкцией только тем, кто заходит во двор.
Особенно эффектно такая конструкция выглядит в летнее время, когда кованые элементы дополняют живые вьющиеся растения, которые оплетают ворота с двух сторон.
И наконец, последнее из преимуществ – экологичность. Материал, из которого изготавливают прочные металлические узоры, безопасен как для вас, так и для окружающей природы.
Конструкции
Существует несколько основных типов ворот. Каждую из таких конструкций талантливый мастер при желании сможет украсить подходящим узором. А при необходимости можно закрепить детали даже самостоятельно, используя обычную сварку.
Распашные
Именно этот тип изделий считают классическим.
Простые распашные ворота используются на многих загородных участках. Они открываются вручную, распахиваясь в разные стороны. Выглядят красивые распашные ворота аккуратно, и в то же время очень красиво. Лучше всего сочетается подобная конструкция с домами в классическом стиле. Распашные ворота могут украшать сварные накладки по углам или изящные узоры по всей поверхности.
Откатные
Второй популярный вариант ворот – откатные. Они, в отличие от распашных, всегда цельные и открываются автоматически. Полотно ворот откатывается в сторону, открывая проход. Такой вариант имеет много преимуществ. Во-первых, не приходится выходить из машины для того, чтобы открыть ворота.
Стоит обратить внимание, что отличаются не только типы конструкций ворот, но и сами материалы, применяемые производителями. Чаще всего территорию двора защищают прочные железные ворота. Реже встречаются деревянные изделия или модели из профнастила. Они более дешевы, поэтому подходят тем, кто уже истратил весь свой бюджет на постройку коттеджа своей мечты. Деревянные ворота декорируют накладками из тонкого металла с изысканными узорами. Металлические конструкции декорируют ажурными вставками, как по центру, так и по краям.
По бокам от ворот практически в любом случае располагаются столбы.
Это – гарантия устойчивости ваших ворот. А чтобы они выглядели красивее, их декорируют навершиями разного типа. Такие накладки из холодной стали могут быть фигурными, треугольными или круглыми.
Установка
Многие предпочитают доверить установку опытным профессионалам. Если вы хотите все сделать своими руками, то нужно знать все особенности этого процесса.
Начинается установка с фиксации столбов. Выберите подходящее место. Грунт в месте установки должен быть не слишком мягким, а поверхность – достаточно ровная, чтобы столбы были на одной высоте.
Наметьте место для их установки и выкопайте ямы глубиной в 110 сантиметров.
Вырезанный из цельной трубы столп и будет использоваться для надежной фиксации ворот. Его длину стоит просчитывать так, чтобы под землей оставалось 110 см, плюс наземная часть нужной высоты. Чтобы столбы не сгнили со временем, обработайте их должным образом. Протрите специальным составом, обезжиривая, а затем уберите налет при помощи ветоши. Если у вас под рукой нет нужного антикоррозийного состава, то используйте бензин. Он обладает теми же защитными свойствами.
Когда поверхность профтрубы обработана, можно закапывать столпы в яму, засыпать ее землей и хорошо утрамбовывать.
Далее следует установить створки. Устанавливаются они по тому же принципу, что и калитка. Перед тем, как ставить ворота, выровняйте площадку. Сами створки ворот тоже должны быть аккуратными и гладкими. Если есть какие-то заусенцы или неровные края, то можно воспользоваться болгаркой, чтобы подровнять поверхность. Проверьте, стыкуются ли друг с другом детали и открываются ли они, если их зафиксировать.
Если створки сделаны из профнастила или другого плотного и прочного материала, то их стоит украшать коваными элементами уже после того, как вы закрепили ворота.Перед тем как крепить детали, заранее продумайте их расположение и начертите эскиз на бумаге. Это даст вам уверенность в том, что ворота будут выглядеть действительно красиво. Что касается крепления деталей, сначала фиксируются мелкие, потом крупные вставки. Так, например, если вы украшаете ворота кованым узором, похожим на хвост павлина, то начинать стоит сверху и продвигаться вниз. Когда они готовы, можно переходить к креплению задвижки и специальных упоров.
Особенности ухода
После установки кованых ворот нужно обязательно ознакомиться с правилами ухода за ними.
Поскольку ворота постоянно находятся во дворе, то возможные перепады температуры и перемены погоды способны заметно испортить их внешний вид. Чтобы конструкция прослужила вам не один год, а то и не одно десятилетие, за ними нужно правильно ухаживать.
Не стоит подвергать створки такому механическому воздействию, как удары или царапание. Чтобы влажность и перепады температуры не вредили кованым узорам и поверхности ворот, их нужно регулярно чистить. Перед установкой поверхность металла обрабатывается специальными растворами. Со временем они смываются, поэтому их обязательно нужно наносить заново. А все подвижные части, например, петли, надо регулярно смазывать.
Особенности ухода зависят от того, в каком климате вы живете.
Если он жаркий и солнечный, то необходимо покрыть поверхность металла специальной жаропрочной краской. Она не только не облупится на солнце, но и защитит металл. То же можно сказать и про морозостойкие краски, которые спасают кованые ворота от сильных холодов. В качестве альтернативы жаропрочной краске можно использовать простой воск. Натрите им столбы и кованые узоры, и ваши ворота будут не только надежно защищены от жары, но и сохранят привлекательность, сияя на солнце.
Для чистки поверхности профессионалы советуют использовать специальные продукты, которые продаются в виде аэрозолей, порошков или влажных салфеток. Самый удобный вариант – это аэрозоли.
А вот порошки использовать не рекомендуется.
Они могут повредить поверхность и снять слой антикоррозийного или любого другого защитного покрытия.
Они могут повредить поверхность и снять слой антикоррозийного или любого другого защитного покрытия.Красивые примеры
Кованые ворота всегда выглядят красиво. Практически все конструкции индивидуальны и не похожи друг на друга. Но на популярных примерах можно убедиться в том, что кованые ворота действительно способны стать настоящим украшением участка.
Строгая классика
Такие ворота прекрасно смотрятся на фоне классического кирпичного здания с таким же кирпичным забором. Цельные створки из черного метала спереди дополнены изящной кованой конструкцией. Основная часть изделия непрозрачна. А значит, ваш частный участок будет скрыт от посторонних взглядов, и вы будете чувствовать себя в безопасности.
Кованые элементы состоят из ровных линий и изящных завитков, расположенных по центру. Такой узор приятен глазу.
Минимализм
Второй вариант – это ворота, которые украшены коваными элементами только сверху. Они многим кажутся более надежными и уж точно скрывают больше, чем те конструкции, которые состоят только из кованных элементов. Цвета выбраны базовые: сочетание красного с черным всегда выглядит беспроигрышно, в том числе и на фоне серого кирпичного коттеджа.
Прозрачные
Последний пример – это ворота, состоящие полностью из изящных металлических прутьев. Такие ворота, как правило, делают на заказ, чтобы все видели красоту участка и прилегающей территории. Внутри прочной черной рамы находятся интересные узоры, которые составляют гармоничную композицию, способную понравиться многим.
В ней ровные линии сочетаются с красивыми переплетениями завитков. Ничего лишнего, но выглядят они очень оригинально.
Вне зависимости от того, из железа, профнастила или дерева выполнены ваши ворота, их всегда можно украсить коваными элементами. И можете быть уверены в том, что такие украшения полностью преобразят внешний вид ворот и сделают участок по-настоящему роскошным.
О том, как установить ворота, смотрите в следующем видео.
Фотогалерея красивых и оригинальных ворот и калиток в Киеве
ГалереяФотогалерея ворот и калиток
Важным элементом дизайна современной усадьбы или двора есть ворота с калиткой.
Удачно подобранные компоненты, гармонично выбранный цветовой фон указывают на изысканный вкус хозяев. Компания «Купизабор» предлагает обратить внимание на фото красивых железных ворот и калиток, мы также располагаем широким ассортиментом готовых дизайнерских решений, что не оставит безразличным даже самого скрупулезного Заказчика. Мастера компании изготовят вариант по вашему эскизу, учитывая вкусовые особенности и пожелания, не нарушив визуальный баланс и общий дизайн строений. Компания «Купизабор» занимается изготовлением ограждений на профессиональном уровне. На фото ворота и калитки из профнастила выглядят стильно и оригинально, но также не подводят по качеству, что оценили многие наши клиенты. Изделиям присущи такие преимущества, как способность выдерживать высокие нагрузки, надежность, простота эксплуатации и ухода, защитные и антивандальные свойства, стильный дизайн, устойчивость к погодным факторам и долговечность службы.
Красивые фотографии ворот и калиток в Киеве
Широкий ассортимент нашей продукции: заборов, ворот и калиток, вывел нашу компанию в лидеры по изготовлению и установки любых видов ограждений в Киеве и области.
В галерее готовых работ и примеров, наши ворота и калитки представлены в широком ассортименте. Дизайнеры компании не устают работать над новыми конструкциями, улучшая их внешний вид и эксплуатационные характеристики.
Одним из предлагаемых решений для дома являются металлические распашные ворота фото, которых вы сможете посмотреть в нашей галерее. Мастера компании имеют большой опыт по установке таких ворот. Высота и ширина оговаривается в индивидуальном порядке по приезду замерщика. Выезд специалиста осуществляется за наш счет.
Представленные фото ворот из профнастила или других материалов доказывает, что мы добросовестно выполняем свою работу. Используем надежные материалы, инновационные технологии и соблюдаем ранее оговоренные сроки выполнения монтажа. Выбрав подходящий вариант из наших фото красивых ворот и заборов, вы можете быть уверены – они прослужат долго и безукоризненно.
Фотографии ворот из профнастила вы можете посмотреть в нашей галерее и подобрать именно тот вариант, который будет Вам по душе.
Цена таких изделий невысока. Качество и долговечность компания гарантирует до 5 лет. Особый интерес у покупателей вызывают фото красивых ворот для дома, выполненных из следующих материалов:
- Профнастил – модели выполняются в лаконичном простом дизайне, но также можно использовать элементы ковки.
- Дерево – изделия смотрятся очень презентабельно благодаря декору металлическими элементами и художественной ковкой.
- Ковка – это изумительные кованые ворота, которые выбирают для территорий, где не требуется достичь приватности, и нужно сохранить обзор.
Мы работаем по Киеву и области, обеспечивая полный комплекс услуг – осуществление замеров, подготовка территории, доставка материалов, установка ограждений и уборка строительного мусора. На указанный адрес приедут специалисты, подскажут с выбором, сделают необходимые замеры и помогут оформить заказ
[Всего голосов: 30 Средняя оценка: 2.9]Распашные ворота для дачи — 88 фото идей оформления и украшения
Как театр начинается с вешалки, так и дача берет свое начало с ворот.
Это своеобразная визитная карточка владельцев дома. Ворота обязаны смотреться солидно и стильно.
Но не надо забывать о том, что их главная функция – обеспечивать защиту придомовых территорий.
Достоинства и минусы распашных ворот
У распашных ворот имеются следующие достоинства:
- Достаточно низкая стоимость.
- Разнообразие форм и исполнений.
- Долгое время службы.
- Такие ворота имеют несложное конструкционное решение.
- Они прочные и надежные.
- Распашные ворота легки в использовании.
- Их несложно обслуживать.
- Они не требуют забетонированной площадки.
- Существует возможность установки автоматики.
Минусы:
- Распашные ворота требуют наличия свободного места для закрытия – открытия.
- Необходимо брать во внимание ветровую нагрузку.
Все перечисленные недостатки можно легко устранить – они не критичны. Распашные ворота используются в течение очень долгого времени, за такой продолжительный период они показали свою надёжность.
Конструкционное решение распашных ворот
Для ворот могут применяться самые разные материалы, но их конструкция остаётся неизменной. Из фото распашных ворот видно, что они состоят из:
- Опорных стоек (столбов), на которые они непосредственно крепятся.
- Деревянной или металлической рамы.
- Обшивки.
- Петлей.
- Задвижек и замков.
Как самостоятельно сделать распашные ворота
Для собственноручного возведения ворот вам понадобится набор инструментов, состоящий из болгарки, нарезных кругов, шлифовальных дисков, сварки, электродов, уголка, молотка, лопаты и мастерка. Нелишними будут рулетка и уровень. Также может понадобиться дрель, клепатель и компрессор.
Говоря о материалах, будет необходима профилированная труба (для каркаса). Лучше всего использовать трубу сечением 60*40*1,5. Но неплохим вариантом будет и 40*20*1,5. На окончательное решение влияет материал обшивки и показатель ветровой нагрузки.
Кроме этого, потребуются трубы для столбов. При их выборе нужно учитывать массу воротных створок.
Еще нужны петли, замок, краска, облицовочный материал, автоматика. Петли можно выбрать как регулируемые, так и нет.
Главное, чтобы петли были качественными и могли выдержать большой вес. Замок может быть механического или электромеханического типа – на ваш выбор.
Возведение распашных ворот состоит из двух этапов:
- Монтаж столбов, на которые в последующем будут навешены воротные створки.
- Изготовление самих ворот
Порядок работы может быть любым. Но помните, что надо, чтобы опоры ворот выстояли семь дней. За это время можно сварить основную конструкцию.
Далее рассмотрим каждый этап подробнее.
Этап первый
Стойки могут быть сделаны из профилированных труб, бетона, кирпича, природного камня, дерева.
Существует два варианта их установки:
- Трубу можно вбить в землю на глубину до 1,5 м. Плюс этого метода – быстрота и экономичность (не требует трат на бетон).
- Опоры ворот можно забетонировать, т. е. сделать под них бетонное основание.
Плюс этого метода – быстрота и экономичность (не требует трат на бетон).Этап второй
Вначале следует определиться с местом, где будут стоять ворота. Далее нужно определиться с размером. Идеально, если вы монтируете ворота в процессе установки ограждения. Но, если забор у вас уже имеется, то необходимо произвести точные замеры.
В этом случае желательно, чтобы стилистика ворот и ограждения совпадали. Следующим шагом делаем раму из профильной трубы. Ее обязательно нужно загрунтовать.
Затем привариваем к раме петли и задвижки. В завершение тщательно протираем раму от пыли и красим ее. Только после этого начинаем заниматься обшивкой ворот.
В качестве облицовочного материала может быть использован металлопрофиль, дерево, металлический лист, кованые конструкции, рабица или сетка из стальной проволоки.
Интересным решением будут разные комбинации материалов.
После закрепления облицовки ворота осталось лишь навесить.
Изготовить ворота самостоятельно не так сложно. Если имеется нужный инструмент и материал, то будет достаточно недели для их установки.
Фото распашных ворот для дачи
Кованые ворота — самые красивые и известные во всем мире
С появлением городских дворцов, загородных особняков и замков возникла потребность в кованых воротах — визитной карточке дома. Парадный въезд становится гордостью владельца поместья или замка, и здесь зачастую рождаются очень достойные и привлекательные творения мастеров декоративно-прикладного искусства.
Многие кузнечные работы ни одно десятилетие, а зачастую и столетия радуют городской ландшафт совершенной формой и удивительной красотой.
Сейчас мы ознакомим наших почитателей с некоторыми интересными объектами, и начнем мы нашу фотовыставку с ворот зарубежных.
В Чехии в одном из изумительных замков установлены умопомрачительной красоты ворота. Дугообразный каркас центральной нераздвижной арки обильно насыщенный волютами и акантами очень гармонично по центру дополнен родовым гербом и короной. Рука талантливого художника приложилась к данному творению в виде чрезвычайно воздушного и очень притязательного рисунка створок и боковых решеток.
На фото №2 утонченные ворота Пражского замка.
На фото №3 удивительная решетка на Вацлавской площади.
В Испании ограничимся Воротами работы великого Гауди в стиле модерн, установленными в Барселоне. В предыдущих статьях мы подробно описывали его творческий стиль в ковке.
Нельзя пройти стороной и мимо музея под открытым небом Италии.
Хотя в ближайшее время мы и посвятим этой стране отдельную огромную статью с обилием фотографий и все же несколько работ мы представим.
На двух фотографиях ниже представлены решетки ворот в Венгрии. Очень ажурный рисунок ворот в барочном стиле украшает площадь перед замком Фертёд.
А это работа известного мастера Генриха Фазолы сохранилась в венгерской столице Будапеште в районе Эгер.
Очень привлекательные ворота украшают и замки в Германии и в Австрии.
Величественные ворота встречают посетителей уникального замкового ансамбля Бельвебер в Австрии. Кажущая простота створок ворот, состоящих из череды вертикальных прутьев, грациозно дополнено превосходной аркой в стиле раннего барокко с большой короной в самой верхней части ворот.
Ворота вновь отреставрированного комплекса в Шлосс Хофе (Австрия) поражают своей массивностью и основательностью.
Отлично сохранились кованые ворота 1885 года руки Карла Фидлера.
Установленные в уличной арке Зальцбурга, ведущей на кладбище, они призывают к спокойствию и скорби.
Один из лучших замков земли Гессен расположен в городке Ханау. Это замок Филиппсруэ, который к тому же является и старейшим в стиле барокко на восточном берегу Рейна. Под стать замку и его очаровательные кованые ворота с металлическими стойками, оканчивающими исключительной красоты фонарями. А также с обилием позолоты в рисунке решетки, которая фантастически переливается в солнечные дни.
Роскошны и ворота в г. Вюрцбург, Германия.
И в замке Альт-Шверин.
В США сохранился ряд ворот в особняках таких знаменитых районов как Лонг Айленд (Нью-Йорк) и Ньюпорт. Высокие двухстворчатые ворота в духе решеток эпохи Европейского Средневековья преграждают путь во дворцы. У всех ворот выделяется красивый кованый декор секций.
Перенесемся в Аргентину. Вход в парк города Мендоза выглядит именно так.
А теперь мы во Франции в её чреве.
Париж – это праздник навечно и он всегда с нами. Очень роскошны кованые ворота дворца Правосудия, Большого Дворца, Малого Дворца и одного из госучреждений.
Пленительные ворота ограждают вход в парк Монсо и в сад Елисейского Дворца.
Первоклассное барочное воротное сооружение установлено в одном из кафедральных соборов столицы.
Вход в известнейший Версальский дворец преграждают высокие ворота, окрашенные царским составом.
К сожалению, это изделие новодел.
Блистательные ворота на площади Станислава в Нанси, исполненные замечательными мастерами Ламур представлены на фото.
Волшебство приветствует людей при входе в городской парк Лиона.
В сказочном лесу Варшавы стоит вот такое чудо.
Перенесемся в Великобританию, довольно чопорную, но всё же гостеприимную.
Кафе бар Лондон.
Королевский военно-морской колледж.
Вход в один из Лондонских парков.
Ворота 18 века Ирландия.
Англия 14 век.
Ворота города Вустер.
Неотразимые ворота английского суда 18 века.
Ворота Брэдфорда.
И напоследок несколько Российских изделий.
На фото ещё стоящие в Костроме (правда в ужасающем состоянии), необычные для такого провинциального городка, бесподобные барочные ворота 19 века.
На фото также требующие капремонта отличные ворота в Бобров переулке Москвы.
На фото №42 представляем прелестные ворота гостиницы Метрополь с очень живописной модерновой композицией.
На фото №43 непревзойденные ворота Зимнего дворца.
На фото 44 и 45 удивительное барочное полотно ворот Екатерининского дворца.
На фото №46 фрагмент удивительно легких ворот Летнего сада в Питере.
И завершающей фотографией №47 нашего экскурса станут ворота питерского особняка Спиридонова по ул.Фурштатской.
Кованые ворота и калитки, изготовление кованых автоматических ворот, цены
Наша компания работает с НДС.
Въездные ворота — не только элемент системы ограждения участка, обеспечивающий доступ на территорию, но и значимая составляющая архитектурно-ландшафтного ансамбля. Именно они являются первым, что видит гость дома, составляя первое впечатление о вашем статусе и достатке.
Одно из наиболее солидных и впечатляющих решений — шикарные въездные ворота, изготовленные методом художественной ковки. Благодаря универсальности железные кованые ворота могут украсить любой дом, от классического коттеджа из кирпича до эксклюзивного футуристического строения.
Кованые ворота — отличный выбор для успешных людей с тонким вкусом
Художественная ковка является трудоемким процессом, требующим от мастера таланта и опыта. Кованые ворота и калитки изготавливают из полнотелого износостойкого металла и покрывают специальной краской, повышающей устойчивость материала к неблагоприятным механическим, химическим, атмосферным воздействиям.
Кованые ворота отличаются особой прочностью и долговечностью — они прослужат десятки и сотни лет, сохраняя первоначальный вид и не нуждаясь в специальном уходе.
К тому же, они могут стать высокохудожественным произведением искусства — цветочные мотивы, фамильные вензеля и гербы, геометрические орнаменты и сюжетные композиции придают кованым воротам с калиткой внутри или без нее неповторимый облик.
Конструкция ворот
Хотя кованые ворота отличаются потрясающим дизайном, они так же надежно, как и другие, защищают территорию от несанкционированного доступа, но при этом не затеняют участок и даже зрительно увеличивают его размеры.
По своей конструкции ворота кованого типа могут быть как распашными, так и откатными. Некоторым клиентам больше нравятся арочные ворота.
Кованые ворота, как и любые другие, можно оснастить автоматикой и вспомогательными опциями. Автоматические кованые ворота, при несколько большей цене, позволяют сэкономить время и повысить уровень комфорта при пользовании въездной группой — их можно быстро и легко открывать прямо из авто при помощи пульта управления.
Компания «Ворота-Кубань» предлагает полный комплекс услуг по изготовлению распашных и откатных кованых ворот в Краснодаре, от разработки оригинального эскиза до установки.
Чтобы уточнить информацию по срокам изготовления и монтажа кованых ворот, звоните +7 (861) 247-57-03, +7 (988) 247-57-03.
описание, фото, цена в Москве
Современный приусадебный участок тяжело представить себе без крепких и просто надежных ворот. Но они встречаются разными, поэтому для собственного удобства и безопасности критично определиться с наилучшими версиями. Наша компания предлагает лучший вид металлических ворот – ворота, выполненные методом художественной ковки (кованые ворота).
Кованые ворота сегодня устанавливать очень популярно. Они подходят под любое ограждение, поэтому с этим не возникнет сложностей. Вид у таких ворот очень презентабельный, служат они десятилетиями. К тому же, они служат отличной защитой для придомовой территории. Достаточно часто покупатели отдают предпочтение таким воротам, поскольку они обладают всеми необходимыми характеристиками.
Кованые ворота являются настоящим украшением любого участка.
Оригинальный внешний вид таких конструкций от нашего производителя отлично впишется в общее оформление дома и прилегающей к нему территории. В компании «ковка-в-москве.рф» вы можете заказать ворота дёшево и при этом получить изделия высокого качества. Большой ассортимент уже готовых кованых ворот позволит быстро выбрать наиболее подходящий вариант. При необходимости всегда можно заказать изготовление с учетом индивидуальных требований к размерам, оформлению и функциональным возможностям. Специалистами компании создан на сайте раздел про кованые ворота, на котором размещены фото и описания изделий различных конструкций. Это позволяет всем желающим посмотреть выполненные работы и оценить уровень профессионализма мастеров «ковка-в-москве.рф».
Вы можете выбрать любое фото или даже прислать своё – мы изготовим для Вас всё по фотографии.
Виды и типы металлических ворот в целом
Листовые ворота
Самыми крепкими и дешевыми считаются механические листовые распашные ворота, свариваемые электрической сваркой из стального листа (до 1.
5 мм) и металлических уголков большого сечения (до 65 мм). Последние выступают в роли ребер жесткости и значительно увеличивают прочность всей конструкции. Можно быть уверенным, что таранным ударом данные версии ворот взломать практически невозможно. В особенности, если выбрать правильные петли класса «папа-мама», отличные повышенной прочностью. Если внутрь данных петель перед установкой створок не забыть закапать немного машинного масла и установить небольшой шарик из шарикоподшипника, то створки может открыть даже ребенок.
Кованые ворота
Узор на кованых воротах
Более легкими и достаточно красивыми считаются кованые ворота, в которых несущие элементы изготавливаются по технологии ковки. В результате внутри металл получается кристаллическим и очень твердым. Недостаток – высокая стоимость, которая окупается легкостью и прочностью. О них и пойдет речь далее в статье.
Литьевые ворота
Несколько более дешевыми считаются литьевые ворота, изготавливаемые из серого чугуна по технологии доброго старого литья.
В результате получаются настоящие чугунные ворота, которые практически не коррозируют. Если быть точнее, то внешняя часть покрывается сухой коррозией, которая далее не прогрессирует. Даже если забыть покрасить данные версии ворот, то они за счет устойчивости к коррозии смогут прослужить долгие десятилетия.
Подробнее о кованых воротах
Немаловажно перед покупкой определиться, какого именно вида будут устанавливаться кованые ворота, ведь они представлены в разных вариантах. Бывают открытые и глухие ворота, а также комбинированные полотна. Чтобы понять, какие из них подходят больше всего, стоит детальнее изучить их особенности.
Виды кованых ворот
- Кованые ворота открытого вида обладают превосходным внешним видом. Полотна изделий абсолютно прозрачные и украшены необыкновенно красивыми элементами ковки. Минус данного типа ворот заключается в том, что все прохожие смогут видеть, что происходит возле дома. Отдыхая во дворе, домочадцы всегда будут на виду у всех. Этот момент приемлем далеко не для всех.
- Гораздо комфортнее себя чувствовать за воротами закрытого типа. Они представляют собой глухие металлические полотна, украшенные коваными деталями. Нередко эти ворота устанавливаются на территории загородных домов. Ведь они служат хорошей защитой от злоумышленников и недобрых чужих взглядов.
- Если сложно определиться с выбором между первым и вторым вариантом, стоит обратить внимание на комбинированные кованые ворота. При производстве этих ворот нижняя часть полотен изготовляется из металлического листа, а верхняя остаётся открытой и отделывается коваными узорами. Вид у данных ворот превосходный.
Этот момент приемлем далеко не для всех.Типы кованых ворот
Кованые ворота могут быть одностворчатыми, двухстворчатыми, арочными. Они оснащаются надежной фурнитурой (петли, ручки, запоры) и отличаются следующими особенностями:
- привлекательным дизайном и возможностью установки декоративных элементов;
- прочной и долговечной конструкцией;
- устойчивостью к атмосферным воздействиям;
- простотой монтажа и обслуживания;
- стоимость ворот всегда остается умеренной.
Распашные кованые ворота
Внимания заслуживают распашные кованые ворота. Они способны похвастаться многими преимуществами. Среди которых стоит отметить следующее:
- эти виды ворот очень удобны в применении. Можно оснастить их автоматическим механизмом открывания. Также реально их открыть и вручную;
- если планируется устанавливать кованый забор, то распашные кованые ворота станут превосходным решением. Ведь в данном варианте откатные виды ворот испортят весь вид ограждения;
- кованые полотна станут настоящим украшением для придомовой территории. Каждый элемент ковки по-своему уникален и поэтому полотна ворот в целом имеют достаточно эксклюзивный вид.
Благодаря наличию у кованых ворот всех этих плюсов, многие уже установили их себе, а те, кто ещё до сих пор этого не сделал, наверняка, мечтают о подобном приобретении.
Уход за воротами из кованого железа
Орнамент на кованых воротах
Кованые ворота — лучший тип ворот для вашего дома.
Качество, устойчивость, долговечность и стиль являются их главными отличительными преимуществами. И хотя кованое железо считается одним из самых дорогостоящих материалов, такие ворота прослужат вам не одно десятилетие. Но для этого потребуется поддерживать их в хорошем состоянии. В этом поможет данное руководство.
Вам понадобится:
- садовый шланг
- моющее средство
- теплая вода
- ведро
- мягкая щетка
- скребок
- губка
- наждачная бумага
- грунтовка
- краска
Шаг 1 - вымыть мыльным раствором
Разведите немного моющего средства в теплой воде в ведре. Перемешайте, пока не образуется много пены. Окуните губку в ведро и нанесите на ворота. Используйте скребок, если нужно удалить грязь или птичий помет.
Шаг 2 - промыть водой
Используйте свой садовый шланг, чтобы тщательно смыть мыльный раствор. Не должно остаться следов мыла, они могут вызвать изменение цвета ворот при высыхании.
Затем дайте воротам просохнуть на солнце в течение нескольких минут.
Шаг 3 - осмотреть на ржавчину
Ржавчина — самая большая проблема для железа на открытом воздухе. Поэтому вы должны время от времени осматривать ворота на ее наличие. Удаление ржавчины легче на начальных этапах возникновения, но если оставить это дело без присмотра, процесс коррозии будет происходить интенсивнее.
Шаг 4 - удалить ржавчину
Используйте наждачную бумагу, чтобы затереть поврежденные участки ворот. Обязательно удалите ржавчину с обоих сторон, а также в труднодоступных местах.
Шаг 5 - вымыть и просушить
Вымойте ворота еще раз, как описано в первом шаге. Затем тщательно смойте водой из садового шланга и снова оставьте на просушку. Подождите около 30 минут.
Шаг 6 - нанести грунтовку
Лучше всего использовать грунтовку, которая подходит для железа. Убедитесь, что она содержит ингибиторы ржавчины.
Вы можете использовать распылитель для облегчения нанесения. Откройте ворота и начинайте наносить грунтовку на одну створку сверху вниз. Затем перейдите на другую сторону и повторите процесс. Затем эти действия произведите со второй створкой. Для большей защиты лучше нанести 2 слоя грунтовки. В этом случае дайте первому слою хорошо высохнуть, прежде чем наносить второй.
Шаг 7 – покраска
На заключительном этапе вы можете покрасить ворота краской, подходящей для кованого железа. Это обеспечит дополнительную защиту ваших ворот от ржавчины. Аналогично, лучше нанести два слоя так же, как в случае с грунтовкой.
Совет
Регулярно чистите свои ворота из кованого железа. Чем больше грязи на них накапливается, тем больше вероятность поражения ржавчиной или коррозией.
Процесс заказа и изготовления кованых ворот
Благодаря высокому уровню профессиональной подготовки и большому практическому опыту мастеров нашей компании, кованые ворота на заказ изготавливаются в минимальные сроки.
При этом качество всех изделий очень высокое. Комплексные услуги по изготовлению и установке ворот «ковка-в-москве.рф» — компания, где купить ворота в Москве и Московской области можно очень просто, воспользовавшись для оформления заказа контактными данными, размещенными на сайте. При этом вам будет предоставлена исчерпывающая информация о сроках изготовления, стоимости, вариантах комплектации ворот.После оформления заказа на дешевые ворота, цена которых невысока, на объект, где предполагается установка, выезжает мастер. Он выполняет необходимые замеры и уточняет особенности расположения оград. Такая услуга, для объектов, расположенных в Москве и ближайшем подмосковье, предоставляется бесплатно. Выполнив замеры, специалисты компании производят предварительный расчет стоимости ворот согласно разработанной документации: эскизов, чертежей, спецификации на материалы и фурнитуру. Затем проект предоставляется вам для согласования.
Если никаких вопросов и уточнений не возникает, то мастера приступают к изготовлению ворот.
Компанией «ковка-в-москве.рф» осуществляется не только продажа кованых ворот, изготовленных по индивидуальному заказу, но и предоставляются услуги по доставке и установке таких изделий. При этом гарантируется точное соблюдение сроков и аккуратность выполнения всех работ. На кованые ворота прайс лист доступен на сайте компании или по телефону. Чтобы уточнить цены, в случае изменения комплектации или выбора дополнительных элементов, можно связаться со специалистами нашей компании.
Отличительными чертами сотрудников нашей компании являются вежливость, стремление предоставить максимальную информацию о предоставляемых услугах и наиболее полно ответить на все ваши вопросы. Вам всегда подскажут, какой материал лучше выбрать, посоветуют оптимальный набор фурнитуры, расскажут, сколько стоят ворота или отдельные декоративные элементы. При необходимости всегда можно выполнить предварительный расчет стоимости будущей конструкции и оценить требуемые затраты.
Установка ворот
Вышеуказанные ворота еще нужно правильно устанавливать. Для этого выкапываются лунки глубиной до полуметра, внутрь устанавливаются несущие трубы диаметром до 130 мм, на них навариваются петли и далее на них навешиваются створки ворот. Останется установить замки – сувальдные или цилиндровые – и безопасность всего приусадебного участка окажется гарантированным делом.
Определение стоимости кованых ворот
Перед тем, как приобрести кованые ворота недорого, можно предварительно рассчитать их цену. Чтобы узнать точную стоимость ворот учитывают материалы, из которых они будут изготовлены (стальные, чугунные, медные, бронзовые трубы и пруты). Кроме того принимается во внимание сложность конструкции, наличие декоративных элементов, комплектация фурнитурой. Если вам нужны ворота, то обращение к специалистам «ковка-в-москве.рф» позволит быстро получить изделия высокого качества, отличающиеся оригинальным внешним видом и приемлемой стоимостью. Необходимо учитывать, что существующий прайс на ворота, может периодически изменяться в связи с проведением различных акций или снижением цен на изделия компании.
ворот, ограждений и таймеров | PASCO
Photogates — это основной продукт каждой физической лаборатории, используемый для обучения студентов фундаментальным понятиям об измерении временных интервалов и вычислении скорости и ускорения по их измерениям. Учителя физики предпочитают световые ворота традиционным секундомерам из-за их повышенной точности.
Фотошлюз — это устройство для измерения времени, которое измеряет время изменения состояния инфракрасного луча, заблокированного флажком известной длины, а также время разблокировки луча.Используя длину флажка и заблокированное время, учащиеся могут рассчитать скорость. Чем меньше длина флажка, тем более «мгновенным» становится измерение. Используя «Пикетный забор» (карточка с несколькими флажками), учащиеся могут рассчитать ускорение.
Photogates также может измерять вращение шкива с достаточно широкими спицами, которые действуют как «флажки», блокируя инфракрасный луч фотозатвора.
Типичные приложения
- Определение g, ускорение свободного падения
- Скорость и ускорение
- Движение снаряда
- Машина Этвуда
- Столкновения
- Импульс и импульс
- Сохранение импульса
- Кинетическая энергия
- Простой маятник
- Центростремительное ускорение
Показан Smart Gate с прикрепленной к нему цепочкой Photogate Head. Оба прикреплены к динамической дорожке с помощью кронштейнов с фотозатвором, а автомобили PAScars оснащены ограждениями для тележек. Использование Smart Gate и Super Pulley для измерения ускорения PAScar.Умные ворота
Новейшие интеллектуальные воротаPASCO, Wireless Smart Gate, обладают теми же функциями, что и PASPORT Smart Gate, но не требуют интерфейса. Вместо этого он подключается напрямую к вашим компьютерам, Chromebook, планшетам или смартфонам через Bluetooth 4 или через USB.
Smart Gates — это усовершенствованный дизайн традиционных фотозатворов. Как PASPORT Smart Gate, так и Wireless Smart Gate можно настроить для всех традиционных видов использования стандартного фотозатвора, а с их новыми функциями — экспериментов, которые не могут быть выполнены с помощью стандартного фотозатвора.
Smart Gates содержит два фотозатвора, расположенных на расстоянии 1,5 см друг от друга, что дает им более точное измерение скорости по сравнению с любым традиционным фотозатвором.
Время нарастания и спада измерений Smart Gate меньше, чем у любого другого фотозатвора, что обеспечивает более точное время.Smart Gates также включает вспомогательный порт для последовательного подключения дополнительной головки Photogate или аксессуара Time of Flight. Используйте встроенную направляющую ленты Photogate, чтобы использовать нашу майларовую ленту Photogate Tape для измерения скорости и ускорения быстро движущихся объектов, которые слишком велики, чтобы пройти через интеллектуальные ворота.
Smart Gates также включает лазерный переключатель, который позволяет использовать простую лазерную указку в качестве луча. Это полезно для измерения времени появления очень больших объектов или когда вам нужно очень большое расстояние между лучами.
Smart Gates имеют такую же монтажную площадь, что и наша традиционная головка с фотозатвором, и совместимы со всеми устройствами, совместимыми с фотозатвором PASCO.
ХарактеристикиWireless и PASPORT Smart Gate
- Два фотозабора на расстоянии 1,5 см
- Направляющая ленты Photogate
- Лазерный переключатель
- Вспомогательный порт
- Включает монтажный стержень
Совместимость Smart Gate
PASPORT Smart Gate напрямую совместим с интерфейсами PASPORT (за исключением Xplorer GLX и SPARK Science Learning System).
Wireless Smart Gate совместим с устройствами, которые изначально поддерживают Bluetooth 4 или используют наш USB-адаптер Bluetooth. См. Сведения о беспроводной совместимости. Он также может напрямую подключаться к устройствам со стандартным USB-портом.
Беспроводной Smart Gate
Wireless Smart Gate обладает всеми функциями проводного Smart Gate, а также дополнительной гибкостью беспроводного подключения к вашей системе сбора данных.
Быстрый просмотрУмные ворота
Photogate, который может быть подключен к любому интерфейсу PASPORT, имеет вспомогательный порт для последовательного подключения ворот, двойные лучи для точного измерения скорости и специальный слот для ленты Photogate.
Быстрый просмотрГоловка фотозатвора
Первоначально разработанные как часть оригинальной линейки датчиков PASCO ScienceWorkshop, головки Photogate совместимы с универсальными интерфейсами 550 и 850, устаревшими интерфейсами ScienceWorkshop и требуют цифрового адаптера для подключения к интерфейсам PASPORT, таким как AirLink.
См. Сравнение интерфейсов. Головку Photogate можно также последовательно подключить к Smart Gate.
Головка фотозатвора
Контролирует движение объектов, проходящих через его ворота, подсчитывая события, когда объект прерывает инфракрасный луч.
Быстрый просмотрАвтономные опции
Если вы не планируете использовать программное обеспечение PASCO или просто предпочитаете независимую систему, доступны системы таймера Digital Photogate и системы интеллектуального таймера.
Цифровая система таймера — это законченная система, простая и надежная с высоким разрешением. Он имеет простую встроенную память для двухкратной записи.
Smart Timer System — это автономный таймер, который может управлять одной или двумя головками фотозатвора.Доступен отдельно (с прилагаемыми ограждениями) или как полная система.
Интеллектуальный таймер имеет простые кнопки настройки для всех наиболее распространенных применений фотозатвора, включая штакетные ограждения, маятники, столкновения, шкивы с двойными воротами и многое другое.
Умный таймер
Универсальный экономичный портативный способ измерения точного времени, скорости, ускорения и счета.
Быстрый просмотрПринадлежности Smart Gate и Photogate
Аппарат, обычно используемый с головками Smart Gates / Photogate
Вращающаяся платформа
Устойчивое основание и прецизионные подшипники являются одним из основных компонентов полной системы вращения (ME-8950A).
Быстрый просмотрДополнительные ресурсы
Если у вас есть дополнительные вопросы относительно нашего оборудования или программного обеспечения, обратитесь в службу технической поддержки PASCO. Мы здесь, чтобы помочь.
PHOTOGATE — SmartSchool Systems
Мероприятия и учебный план:
5-минутные занятия с датчиками НАЖМИТЕ ЗДЕСЬ , чтобы получить образец
Наука в работе с 96Dataloggers EasySense Datalogger Activites НАЖМИТЕ ЗДЕСЬ для образца
Химические исследования в средней школе с регистраторами данных НАЖМИТЕ ЗДЕСЬ для получения образца
Исследования импульса движения и столкновений физики средней школы с регистраторами данных НАЖМИТЕ ЗДЕСЬ для анализа образца
для образцаИсследование датчика силы с регистраторами данных НАЖМИТЕ ЗДЕСЬ для образца
Физика:
- Динамические эксперименты, которые включают расчет времени, скорости, скорости, ускорения с использованием наклонной плоскости или воздушной трассы
- Ускорение свободного падения
- Исследование маятника
- Измерение периода времени колеблющегося тела
- Импульс и изменение количества движения
- Центростремительная сила в маятнике
- Время отклика: менее 5 микросекунд
- Ширина зазора: 56 мм
Фотозатвор установлен в прочном пластиковом корпусе, а съемный зажимной стержень можно установить тремя различными способами для облегчения позиционирования при различных исследованиях.
Светодиод в пластиковом держателе мигает, когда луч прерывается, что помогает при настройке с помощью собственных тележек и наклонных плоскостей.
Работает со следующими регистраторами данных:
VHub4 и VHub8
СОДЕРЖАНИЕ ПУНКТА
Фотогальваническая заслонка с опорным стержнем
Фотогальваническая заслонка — определение и значение
ZAHN: Сенатор Грэхем, я просто хочу быстро закончить вашей реакцией на так называемый «фотозабор », фотографию президента Буша, которая используется для сбора денег для его партии.
Расшифровка стенограммы CNN 15 мая 2002 г.
Я думаю, вам следует подумать о переименовании этого инцидента в photogate или footieshirtgate или что-то подобное, так как SADIQ KAHN PHOTOSHOP GATE не совсем так драматичен!
Sadiq Khan Photoshop Gate — Свидетельства
Период легко измерить, используя таймер photogate .
Softpedia — Windows — Все
Заряд, накопленный под фотозатвором во время интеграции, локализуется в потенциальной яме, управляемой транзистором доступа.
неопределенный
Путем вычитания первого сигнала из второго для удаления низкочастотного шума сброса архитектура активных пикселей фотозатвора может выполнять коррелированную двойную выборку.
неопределенный
Заряд, накопленный под фотозатвором во время интеграции, локализуется в потенциальной яме, управляемой транзистором доступа.
неопределенный
Основным преимуществом конструкции фотозатвора является снижение уровня шума при работе при слабом освещении по сравнению с фотодиодными датчиками.
неопределенный
Путем вычитания первого сигнала из второго для удаления низкочастотного шума сброса архитектура активных пикселей фотозатвора может выполнять коррелированную двойную выборку.
неопределенный
C. 2) После того, как тележка A проходит через фотозатвор , она измеряет другую скорость (медленнее).
Yahoo! Ответы: Последние вопросы
C. 2) Измерение скорости после того, как тележка А прошла через фотозатвор , отличается от измерения скорости, когда произошло столкновение, потому что тележки движутся медленнее?
Yahoo! Ответы: Последние вопросы
Произошла ошибка при настройке пользовательского файла cookie
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности.Если ваш браузер не принимает файлы cookie, вы не можете просматривать этот сайт.
Настройка вашего браузера для приема файлов cookie
Существует множество причин, по которым cookie не может быть установлен правильно. Ниже приведены наиболее частые причины:
- В вашем браузере отключены файлы cookie. Вам необходимо сбросить настройки своего браузера, чтобы он принимал файлы cookie, или чтобы спросить, хотите ли вы принимать файлы cookie.
- Ваш браузер спрашивает вас, хотите ли вы принимать файлы cookie, и вы отказались.Чтобы принять файлы cookie с этого сайта, нажмите кнопку «Назад» и примите файлы cookie.
- Ваш браузер не поддерживает файлы cookie. Если вы подозреваете это, попробуйте другой браузер.
- Дата на вашем компьютере в прошлом. Если часы вашего компьютера показывают дату до 1 января 1970 г., браузер автоматически забудет файл cookie. Чтобы исправить это, установите правильное время и дату на своем компьютере.
- Вы установили приложение, которое отслеживает или блокирует установку файлов cookie.Вы должны отключить приложение при входе в систему или проконсультироваться с системным администратором.
Почему этому сайту требуются файлы cookie?
Этот сайт использует файлы cookie для повышения производительности, запоминая, что вы вошли в систему, когда переходите со страницы на страницу. Чтобы предоставить доступ без файлов cookie потребует, чтобы сайт создавал новый сеанс для каждой посещаемой страницы, что замедляет работу системы до неприемлемого уровня.
Что сохраняется в файле cookie?
Этот сайт не хранит ничего, кроме автоматически сгенерированного идентификатора сеанса в cookie; никакая другая информация не фиксируется.
Как правило, в файле cookie может храниться только информация, которую вы предоставляете, или выбор, который вы делаете при посещении веб-сайта. Например, сайт не может определить ваше имя электронной почты, пока вы не введете его. Разрешение веб-сайту создавать файлы cookie не дает этому или любому другому сайту доступа к остальной части вашего компьютера, и только сайт, который создал файл cookie, может его прочитать.
Как #PhotoGate Хлои Кардашьян разоблачила токсическую «телесную позитивность» компании Kardashian Inc.
К настоящему времени мы привыкли к тому, что члены клана Кардашьян-Дженнер постоянно появляются и исчезают из цикла новостей из-за различных неудач, связанных с фотошопами, и обвинений в том, что они продвигают нездоровый образ тела в социальных сетях, от спонсируемых кроссовок для талии до диетических леденцов. Но немногие споры, связанные с магнатами красоты и их одержимостью демонстрацией физического совершенства во все времена, были столь же озадачивающими, как последствия нефильтрованной фотографии Хлои Кардашьян, которая появилась на этой неделе.
Серия событий, приведших к тому, что звезда реалити-шоу и основатель Good American обратилась к этому вопросу в заявлении, и несколько видеороликов в Instagram в четверг настолько же ошеломляющи подробны, сколь и византийские по сюжету.Как сообщается, в пасхальное воскресенье 86-летняя бабушка Хлои «MJ» Шеннон сфотографировала свою 36-летнюю внучку перед бассейном в бикини без каких-либо заметных фильтров или редактирования, которое было случайно загружено в социальные сети с помощью помощника. Вскоре после того, как фотография появилась на Reddit и других веб-сайтах, команда законных представителей семьи приступила к работе, пытаясь удалить изображение из Интернета. Несколько пользователей социальных сетей заявили, что их учетные записи заблокированы, а сообщения, содержащие фотографию или о ней, были удалены.Пользователь Twitter по имени @KosmeticKrys даже разместил скриншоты уведомления об удалении в соответствии с Законом о защите авторских прав в цифровую эпоху (DMCA), которое она получила в электронном письме от имени поверенного, представляющего Кардашьян.
Трейси Ромулус, директор по маркетингу KKW Brands, опубликовала заявление на Page Six , подтверждающее попытки команды Кардашьян стереть фотографию из Интернета, заявив, что «Хлоя выглядит красиво, но это находится в пределах прав правообладателя. не желать, чтобы изображение, не предназначенное для публикации, было удалено.Конечно, последнее слово по этому поводу должна была оставить сама Хлоя, разместив в Twitter заявление из четырех частей, в котором описывались насмешки, с которыми она столкнулась как так называемая «уродливая сестра», и давление, которое она испытывает, чтобы соответствовать «невозможным стандартам» красоту и, в конечном итоге, защиту ее права не хотеть снимать фотографию, которую она не соглашалась публиковать в Интернете. В этих абзацах пропитано утверждение, что независимо от того, как она выглядела на той неотредактированной фотографии, тело, которое она представляет в социальных сетях, настоящее.Точно так же в Instagram она приложила к заявлению несколько видеороликов, демонстрирующих ее фигуру, чтобы доказать, что ее тело «не подверглось фотошопу».
«Мне нравится хороший фильтр, хорошее освещение и редактирование здесь и там», — сказала она в заявлении. «Точно так же я накрашу, накрашу ногти или ношу туфли на каблуках, чтобы представить себя миру так, как я хочу, чтобы меня видели, и это именно то, что я буду продолжать без извинений. Мое тело, мой имидж и то, как я хочу выглядеть, и чем я хочу поделиться, — это мой выбор.Никто больше не должен решать или судить, что приемлемо, а что нет «.
В то время как комментарии к постам Хлои были переполнены списком из « Ты идешь, девушка » и « Я люблю тебя » от фанатов и, конечно же, ее звездной тусовки, другие заметили диссонанс между реальностью. Законные претензии звезды на роль жертвы в отношении ее обращения в СМИ и ее потребности убедить скептиков в том, что безупречно подтянутое и пышное тело, которое она демонстрирует в своем Instagram, на самом деле принадлежит ей — наряду с объяснением того, что она «так усердно работает» для этого.
Очевидно, что значительная роль Хлои и ее семьи в сохранении нереалистичных стандартов красоты, которые она описывает как «невыносимые», требует дополнительной паузы. А именно, Хлоя, Ким и их сводная сестра Кайли Дженнер за последние несколько лет были вызваны за рекламу тренажеров для талии, коктейлей для похудения, детокс-чаев и других продуктов быстрого приготовления, большинство из которых, как сообщается, вызывают проблемы со здоровьем. — своим миллионам молодых впечатлительных поклонников в социальных сетях, в основном девушкам и женщинам от подростка до двадцати пяти лет.
Но, как и большинство юридических лиц, продающих товары женщинам за последнее десятилетие, кардашцы нашли способы исказить все более доступный и востребованный язык бодипозитива и заботы о себе, а также концепцию тяжелой работы, чтобы сформулировать достижение физического совершенство не только для здоровья, но и для расширения возможностей. Соответственно, активисты осудили недавнее кооптирование некогда радикальных движений, призванных освободить жирные тела от репрессивных систем, с помощью линий одежды, модных публикаций, диетических программ и таких влиятельных лиц, как кардашцы.Однако экономические стимулы всегда имеют приоритет над реальными потребностями женщин.
«Но, как и большинство юридических лиц, продающих товары женщинам за последнее десятилетие, кардашцы нашли способы … считать достижение физического совершенства не только здоровым, но и расширяющим возможности».
Самый яркий недавний пример этого феномена поп-культуры на самом деле связан с Хлоей и шоу о макияже, которое она начала вести на E! в 2017 году назывался Revenge Body . Шоу самосовершенствования, вдохновленное ее собственным путешествием по снижению веса на глазах у публики, помогает обычно толстым людям похудеть и «улучшить» свой имидж с помощью тренеров и стилистов.Как и его предшественник Oxygen My Big Fat Revenge , участники мстят бывшим партнерам, бывшим друзьям, старым боссам и другим людям, которые их опозорили, представив свои трансформации лично в сопровождении своего рода триумфального монолога. Стать той версией самого себя, которой хотят, чтобы вы были самые жестокие люди в вашей жизни, воспринимается как в высшей степени позитивное, потому что это требует труда и решимости добиться этого. Это также явно требует времени, денег и ресурсов, но это никогда не делается в программе.
Аналогичным образом, в заявлении Хлои ее приверженность морально и физически обременительным стандартам красоты оправдывается утверждением, что она не «[заплатила] за все это», как в перенесенной операции, — утверждение, которое горячо оспаривается в Интернете. Но независимо от того, пошла ли она к хирургу, к диетологу, тренировалась с тренером или наняла личного повара, она, по сути, заплатила за то, как она выглядит, в той или иной форме. И идея о том, что «зарабатывать» красотой добавляет к ней добродетель или важность, капитализм делает все возможное.
Тем не менее, кардашцы никогда не могут отказаться от собственной мифологии, какой бы нелепой она ни казалась им на публике, потому что это то, на чем они построили свою нынешнюю карьеру. Подлинно грустное признание Хлои о том, что она умственно и эмоционально страдает от представлений о прекрасном, которые ее семья помогла сформировать, должно быть обернуто милым луком, состоящим из «тяжелой работы» и «выбора». И звезда реалити-шоу продолжит продвигать болезненную задачу достижения невозможных стандартов красоты, которые даже такие богатые белые женщины, как она, вынуждены терпеть неудачу.
Устройства защиты от защемления | Дверь
БЕСКОНТАКТНЫЕ ДАТЧИКИ ТИПА B1
Фотоотражающие устройства
8080-057 ДКС
- 10-25 В переменного тока / 12-30 В постоянного тока
- 35 Ft. (10,6 м) максимальное расстояние срабатывания
8080-051 ME-RG
- 7-30 В переменного тока / 10-42 В постоянного тока
- 30 футов. (9 м) максимальное расстояние срабатывания
8080-053 EMX IRB-RET
- 12-24 В переменного тока / 6-35 В постоянного тока
- 60 футов.(18 м) максимальное расстояние срабатывания
8080-055 Seco-Larm E936-S45RRGQ
- 12-30 В переменного тока / 12-30 В постоянного тока
- 45 футов. (14 м) максимальное расстояние срабатывания
8080-056 Omron E3K
- 24-240 В переменного тока / 24-240 В постоянного тока
- 33 Ft. (10 м) максимальное расстояние срабатывания
Проходные устройства
8080-050 ME-PG
- Приемник: 7-30 В переменного тока / 10-42 В постоянного тока
- Излучатель: 1.5 В постоянного тока (питание от батареи, 2 литиевых AA)
- 50 Ft. (15 м) максимальное расстояние срабатывания
8080-052 EMX IRB-MON
- 12-24 В переменного тока / 6-35 В постоянного тока
- 115 Ft. (35 м) максимальное расстояние срабатывания
- Включает вытяжку
8080-054 Сквозная балка (Seco-Larm E960-D90GQ)
- 12-30 В переменного / постоянного тока
- 90 футов. (27 м) максимальное расстояние срабатывания
КОНТАКТНЫЕ ДАТЧИКИ ТИПА B2
2-проводные контактные кромки с оконечной нагрузкой 10K
8080-071 6-футовый край (ME111-T2)
• Включает монтажный канал — идеально для преграждающих планок
8080-070 5-футовый край (ME123-T2)
• Включает монтажный канал
8080-065 5-футовый край (MGR20-T2)
• Предназначен для установки на 2-дюймовой круглой стойке ворот
8080-066 5-футовый край (MGS20-T2)
• Предназначен для установки на квадратную стойку ворот размером 2 дюйма
4-проводные контактные кромки без оконечной нагрузки 10K
8080-091 6-футовый край (ME111)
• Включает монтажный канал — идеально для преграждающих рычагов
8080-090 5-футовый край (ME123)
• Включает монтажный канал
8080-085 5-футовая кромка (MGR20)
• Разработана для установки на 2-дюймовой круглой стойке ворот
8080-086 5-футовая кромка (MGS20)
• Разработана для установки на квадратную стойку ворот размером 2 дюйма
Принадлежности для контактных датчиков
8080-008 Комплект контролируемого высокочастотного канала связи затвора (RB-G-K10)
• Приемник: 12-24 В переменного / постоянного тока
• Передатчик RB-TX-10: 1.5 В постоянного тока (питание от батареи, 2 литиевых AA)
• Приемник может контролировать до шести кромок контакта
8080-006 Контролируемый передатчик RB-TX-10
8080-079 Модуль с несколькими входами (MIM-62)
• 12-24 В переменного / постоянного тока
• Контролирует до шести внешних устройств защиты от захвата
Микроскоп PhotoGate для отслеживания отдельных молекул в тесноте
Анализатор PhotoGate
PhotoGate использует два отдельных лазерных луча с одинаковой длиной волны возбуждения и ортогональной поляризацией (дополнительный рис.1а). Первый лазерный луч, называемый затворным лучом, фокусируется в плоскости изображения и направляется наружу от центра по спирали для предварительного обесцвечивания круглой области интереса (рис. 1a; дополнительный фильм 1). Затем затворный луч закрывают на несколько секунд, чтобы небольшое количество небеленых молекул могло диффундировать в ROI. Второй луч, называемый лучом визуализации, используется для изображения флуоресцентных молекул в ROI с высоким отношением сигнал / шум (SNR) при освещении с полным внутренним отражением (TIR).Чтобы предотвратить диффузию дополнительных флуоресцентных молекул в ROI во время визуализации, затворный луч многократно перемещается по внешнему периметру ROI. В результате плотность флуоресцентных объектов в области интереса остается низкой и не увеличивается со временем.
Рисунок 1: Изображение PhotoGate для отслеживания одиночных частиц( a ) Схема 2D PhotoGate (верхний ряд) с соответствующими репрезентативными изображениями (нижний ряд). (1) Поверхность клетки сильно украшена флуоресцентно мечеными молекулами (синие кружки).(2–3) Сфокусированный пучок затвора направляется наружу от центра по спирали для предварительного обесцвечивания эллиптической области. (4) Затворный луч отключается, чтобы обеспечить диффузию флуоресцентных молекул с периферии области интереса, которые затем отображаются при освещении TIRF (желтые кружки). (5) Затворный луч многократно включается для фотообесцвечивания флуоресцентных частиц, попадающих в ROI (темно-синие кружки), в то время как отдельные молекулы внутри ROI отображаются при освещении TIRF. Фотообесцвеченные частицы не показаны для ясности.( b ) Линейный профиль интенсивности вдоль линии, разделяющей кольцо PhotoGate пополам, показано в a . ( c ) Покровное стекло, плотно покрытое GFP, отбеливается одним движением кольца PhotoGate, чтобы продемонстрировать профиль отбеливания ( d ) Профиль отбеливания нанесен вдоль черной пунктирной линии в c .
Мы обнаружили, что охвата области диаметром 15 мкм сфокусированным затворным пучком (10 МВт · см −2 , полувысота полной ширины 1 мкм) за 10 с было достаточно для фотообесцвечивания почти всех флуоресцентных молекул в ROI (рис.1b; Дополнительный рис. 2). Во время предварительного обесцвечивания фоновая флуоресценция в области интереса была значительно снижена без значительного (<20%) фотообесцвечивания молекул за пределами области интереса (рис. 1c, d). Диаметр луча изображения соответствует диаметру предварительно обесцвеченной области интереса (дополнительный рисунок 1; дополнительный фильм 2), чтобы предотвратить бесполезное обесцвечивание флуоресцентных молекул за пределами области интереса.
Измерение времени пребывания APPL1 на ранних эндосомах
PhotoGate уникально подходит для наблюдения динамических взаимодействий концентрированных и быстро диффундирующих молекул с относительно неподвижными структурами, такими как большие органеллы в цитоплазме.Чтобы продемонстрировать этот класс приложений, мы использовали PhotoGate для измерения времени пребывания одной молекулы APPL1, медиатора внутриклеточной передачи сигналов EGFR, на поверхности эндосом. APPL1 временно локализуется в субпопуляции пузырьков, созданных клатрин-опосредованным эндоцитозом или микропиноцитозом, и маркирует ранние эндосомы до их превращения в стадию фосфатидилинозитол-3-фосфата (PI3P) 12 (Fig. 2a). Неясно, связывается ли APPL1 плотно со своими везикулами-мишенями и диссоциирует только после получения специфической сигнальной подсказки, или связанные и несвязанные популяции остаются в динамическом равновесии.
Рисунок 2: Измерение времени пребывания APPL1 на ранних эндосомах.( a ) Модель для обмена флуоресцентных APPL1 – GFP с обесцвеченными молекулами APPL1 на эндосоме. ( b ) (Слева) изображение клетки U2OS, экспрессирующей APPL1-GFP, при возбуждении TIRF. Область в цитоплазме диаметром 17 мкм подвергалась фотообесцвечиванию при t = 0 с (в центре), и восстановление флуоресценции GFP-APPL1 в обесцвеченной области регистрировалось с использованием FRAP (справа). ( c ) Типичная кривая FRAP отдельной клетки, измеренная на одной эндосоме после обесцвечивания области диаметром 10 мкм.Красная кривая представляет собой одно экспоненциальное соответствие данных восстановления флуоресценции (средний доверительный интервал ± 95%). ( d ) Время восстановления, измеренное в эндосомах и свободных от эндосом областях цитоплазмы. Линия внутри прямоугольной диаграммы представляет собой медианное значение. Внешние края прямоугольника — это 25-й и 75-й процентили. Усы простираются до минимального и максимального значений. N = 10 ячеек для каждого условия. ( e ) Изображение ячейки APPL1 – GFP U2OS в середине эксперимента PhotoGate.Желтый квадрат представляет собой появление единственной молекулы APPL1 в ранее определенном эндосомном местоположении в ROI. ( f ) Траектории интенсивности флуоресценции отдельных пятен внутри ROI показывают приход и уход одиночных молекул APPL1. (Вверху) увеличенные снимки в разные моменты времени флуоресцентного пятна, отмеченного желтым квадратом в e . ( г ) Время пребывания отдельных молекул APPL1 подобрано с помощью единственного экспоненциального затухания, чтобы получить среднее время жизни (среднее значение и 95% доверительный интервал).
Для обнаружения событий прибытия и отбытия отдельных молекул APPL1 в ранних эндосомах мы временно трансфицировали клетки остеосаркомы U2OS человека с помощью C-концевого слияния зеленого флуоресцентного белка (GFP) и APPL1 (APPL1 – GFP). Клетки выглядели яркими с фоновой флуоресценцией, а эндосомы были видны еще более яркими пятнами (рис. 2b). Клетки предварительно обрабатывали нокодазолом для иммобилизации эндосом (методы) и подтверждения того, что наблюдаемые события прибытия и отбытия одной молекулы пространственно коррелируют с последними известными положениями эндосом (дополнительный рис.3). Высокая концентрация APPL1 как в цитоплазме, так и на поверхности эндоцитарных везикул делает невозможным наблюдение его динамики с помощью стандартной флуоресцентной визуализации TIR (TIRF). Сначала мы выполнили FRAP путем полного обесцвечивания ROI диаметром 17 мкм и визуализации восстановления флуоресценции до достижения устойчивого состояния при освещении TIRF (рис. 2b; дополнительный фильм 3). Во время восстановления плотность APPL1 в отдельных эндосомах почти сразу превысила предел обнаружения одной молекулы, что сделало подходы на основе FRAP непригодными для SPT APPL1 (рис.2в). Среднее время восстановления эндосом составило 24,7 ± 4,5 с (s.e.m; рис. 2d). Интересно, что время восстановления в области, свободной от эндосом, было лишь немного ниже, чем в эндосомах, 21,3 ± 2,7 с (s.e.m; рис. 2d), что позволяет предположить, что восстановление ограничено диффузией. FRAP дает мало информации о скоростях реакции APPL1 на эндосомах в этих условиях, потому что он не может независимо измерять компоненты диффузии и реакции 13 .
PhotoGate обходит эту проблему, напрямую измеряя диссоциацию отдельных молекул APPL1 от эндосом и устраняя сигнал быстро диффундирующих молекул в цитоплазме.Мы обесцвечивали ROI диаметром 15 мкм таким же образом, как и в эксперименте FRAP, с последующим периодическим перемещением затвора луча по периметру ROI каждые 2 с. Луч затвора отбеливал большинство флуоресцентных молекул APPL1, попадающих в ROI (рис. 2e; дополнительный фильм 4), потому что уровни флуоресценции оставались постоянно низкими, пока затвор был включен, и полностью восстанавливались в течение десятков секунд, когда затвор был выключен. ROI отображали при освещении TIR со скоростью два кадра в секунду (протокол покадровой визуализации, состоящий из выдержки 50 мс и затемного времени 450 мс).Мы обнаружили, что отдельные флуоресцентные пятна появляются и отделяются от предварительно обесцвеченной области интереса (рис. 2f). Девяносто пять процентов вновь появляющихся пятен ( N = 84) локализованы в пределах 300 нм от центра ранее обнаруженных эндосом. Поскольку эндосомы распределены редко, область, покрытая кругами 300 нм с центром над каждой эндосомой, занимает только 11 ± 6% от всей площади клетки. Мы пришли к выводу, что вновь появляющиеся пятна представляют собой связывание APPL1 с эндосомами, а не случайное связывание с другими участками клетки ( P <10 -70 ).Распределение времени пребывания отдельных молекул (рис. 2g) показало, что среднее время пребывания APPL1 составляет 8,6 с (7,0–10,9 с, 95% конф.). Интересно, что это в несколько раз короче, чем время восстановления FRAP, что дополнительно иллюстрирует, что данные FRAP часто представляют собой свертку нескольких отдельных процессов, которые нелегко распутать.
Чтобы исключить возможность того, что наблюдаемые исчезновения пятен APPL1 – GFP были результатом фотообесцвечивания, а не физической диссоциации APPL1 от эндосом, мы повторили эксперимент, сохраняя постоянную времени экспозиции на уровне 50 мс и регулируя темное время для изменения время кадра до 150 и 1500 мс.Если бы наблюдаемые явления «вылета» были вызваны фотообесцвечиванием, измеренное время пребывания зависело бы в первую очередь от количества собранных кадров при той же мощности возбуждения TIRF. Напротив, мы наблюдали, что время пребывания остается почти независимым от частоты кадров (Supplementary Fig. 4), демонстрируя, что они соответствуют отклонениям APPL1-GFP от эндосом. Эти измерения подтверждают, что короткоживущая динамическая ассоциация отдельных белков APPL1 с эндосомальной поверхностью может обеспечивать быстрое и хорошо скоординированное перемещение всей популяции APPL1 по мере того, как эндосома переходит на PI3P-позитивную стадию 12 .
Отслеживание диффузии EGFR на клеточной мембране млекопитающих
Затем мы применили PhotoGate, чтобы выявить динамику отдельных рецепторных комплексов на мембране живой клетки. EGFR является прототипом рецепторных тирозинкиназ 14 , включающим внеклеточный лиганд-связывающий домен, одинарную трансмембранную спираль и внутриклеточный тирозинкиназный домен (рис. 3a). Связывание EGF с внеклеточными доменами способствует образованию асимметричного димера внутриклеточных киназных доменов, один из которых аллостерически активирует другой 15 и запускает рекрутирование нижестоящих сигнальных белков.В исследованиях флуоресцентной микроскопии лиганд-индуцированная димеризация косвенно выводилась из различий в константах диффузии между лиганд-связанными 16,17 и безлигандными рецепторами 14,18 . В этих исследованиях плотности мечения поддерживались на несколько порядков ниже, чем фактические плотности рецепторов на клеточной мембране, которые слишком переполнены для SPT. Следовательно, большинство рецепторных молекул оставалось немеченым, и олигомерное состояние молекул EGFR не могло быть напрямую определено подсчетом субъединиц.
Рис. 3. Отслеживание отдельных молекул EGFR в мембране живых клеток( a ) Модель индуцированной лигандом димеризации EGFR. Мономер EGFR содержит внеклеточный лиганд-связывающий участок (синий), одинарную трансмембранную спираль, внутриклеточный домен тирозинкиназы (светло-желтый) и С-концевой хвост. Связывание лигандов EGF с внеклеточным доменом вызывает образование асимметричного димера. ( b ) Молекулы mNeonGreen-EGFR плотно покрывают клеточную мембрану COS7.( c ) Молекулы mNeonGren-EGFR демонстрируют непрерывное восстановление интенсивности флуоресценции в анализе FRAP. ( d ) Подгонка сигнала восстановления флуоресценции (красная кривая) показывает среднюю константу диффузии пятен EGFR. ( e ) В PhotoGate диффузия одиночных молекул mNeonGreen-EGFR отслеживалась в ROI в течение 30 с. ( f ) В среднем с помощью PhotoGate было обнаружено около 47 000 фотонов от одиночных молекул mNeonGreen (среднее значение ± s.e.m). ( г ) В эксперименте sptPALM отдельные молекулы mEos2-EGFR были фотоактивированы с возбуждением 405 нм при t = 0 с, и флуоресцентные пятна отслеживались в течение 5 с.( h ) Количество фотонов, обнаруженных из одиночных пятен mEos2 до фотообесцвечивания (среднее ± s.e.m), было в девять раз ниже, чем у mNeonGreen.
Мы экспрессировали mNeonGreen-слияние EGFR в клетках фибробластов обезьян (COS7). Поскольку клеточная мембрана была плотно покрыта mNeonGreen-EGFR (400 молекул на мкм 2 ), было невозможно отслеживать отдельные молекулы с помощью стандартной визуализации TIRF (рис. 3b), даже во время начала процесса восстановления флуоресценции в FRAP. анализы (рис.3c; Дополнительный рис. 5; Дополнительные фильмы 5–7). Используя FRAP, восстановление флуоресценции EGFR в ROI диаметром 4 мкм на клеточной мембране было зарегистрировано с временным разрешением 100 мс (рис. 3c; дополнительный фильм 5). Анализ восстановления флуоресценции показал, что средняя константа диффузии EGFR составляла 0,22 ± 0,02 мкм 2 s -1 в условиях недостатка сыворотки (фиг. 3d).
Используя PhotoGate, мы одновременно определяли константы диффузии и стехиометрию отдельных комплексов EGFR в реальном времени.Первоначально ОИ диаметром 15 мкм предварительно обесцвечивали путем развертки сфокусированного луча затвора с последующим периодом ожидания в темноте 2 с, чтобы позволить нескольким флуоресцентным молекулам диффундировать в ОИ. После предварительного обесцвечивания отдельные пятна mNeonGreen отслеживались со скоростью 20 кадров в секунду с помощью луча изображения (рис. 3e; дополнительные видеоролики 2 и 8), не оказывая вредного воздействия на живые клетки. Визуализация перемежалась 200-миллисекундной разверткой луча затвора по внешнему периметру ROI. В среднем до момента фотообесцвечивания от одного mNeonGreen регистрировалось ∼47000 фотонов (рис.3е) 19 . Среднее время жизни слежения ( τ ) одиночного mNeonGreen-EGFR составило 10,1 ± 1,2 с. Во время SPT флуоресцентные молекулы за пределами ROI остаются неотбеленными, потому что они не подвергаются освещению TIRF.
Частота стробирования была отрегулирована в зависимости от диаметра ROI, ширины затвора, а также плотности и константы диффузии флуорофоров. Вероятность выхода частиц из ворот рассчитывалась на основе зависимого от времени профиля восстановления в экспериментах FRAP 20 (методы) и поддерживалась низкой (10 -7 ), чтобы предотвратить скопление флуорофоров внутри ROI.
Чтобы сравнить отслеживающую способность PhotoGate и sptPALM, мы заменили mNeonGreen на mEos2, один из самых ярких фотоконвертируемых флуоресцентных белков 8 . Мы экспрессировали mEos2-EGFR в клетках COS7 в тех же условиях и отслеживали отдельные флуоресцентные пятна с помощью sptPALM со скоростью 20 кадров в секунду (рис. 3g; дополнительный фильм 9) 21 . В среднем до фотообесцвечивания мы регистрировали около 5000 фотонов от одного пятна mEos2 ( τ = 1,2 с; рис. 3h). Результаты показали, что SPT пятен mNeonGreen с использованием PhotoGate обеспечивает более чем в 10 раз больший бюджет фотонов и, следовательно, лучшую способность отслеживания, чем sptPALM пятен mEos2.
Константы диффузии отдельных пятен были оценены путем линейной аппроксимации их среднеквадратичного смещения (MSD; рис. 4a, b). Пятна, которые демонстрируют ограниченную диффузию или однонаправленное движение, были исключены из анализа (~ 7%; дополнительный рис. 6a, b). Кроме того, 3–7% комплексов EGFR задерживаются в мембране на несколько секунд (дополнительный рис. 6c), что может отражать временные взаимодействия между EGFR и доменами мембраны 14 , а также кортикальной сеткой актина 22,23 .
Фигура 4. Лиганд-индуцированная димеризация EGFR определяется с помощью анализа диффузии и подсчета субъединиц.( a ) Пример траектории отдельных пятен GFP-EGFR, диффундирующих на клеточной мембране COS7. ( b ) График MSD примерной траектории (среднее ± стандартное отклонение). Наклон линейной аппроксимации (красная линия) представляет собой постоянную диффузии. ( c ) Гистограмма константы диффузии пятен EGFR в отсутствие (вверху) и в присутствии 16 нМ EGF. Множественная подгонка по Гауссу (черная пунктирная кривая) выявляет два основных пика.Без EGF 91% пятен находятся в более диффузном состоянии ( D = 0,25 ± 0,07 мкм 2 с -1 , синяя кривая) и 9% в менее диффузном состоянии ( D = 0,12 ± 0,03 мкм 2 с −1 , красная кривая). Добавление EGF приводит к тому, что 75% пятен переходят из более диффузного состояния в менее диффузное. ( d ) Пример профилей интенсивности пятен EGFR, показывающих одно- (вверху) и двухступенчатое (внизу) фотообесцвечивание. ( e ) Гистограммы этапов фотообесцвечивания пятен GFP-EGFR в отсутствие (вверху) и в присутствии (внизу) EGF.( f ) Средняя константа диффузии пятен EGFR, которые фотообесцвечиваются в одно- и двухступенчатом режиме с EGF и без него (среднее значение ± s.e.m).
Гистограмма констант диффузии свободно диффундирующих молекул выявила две различные популяции (рис. 4c). В отсутствие лиганда EGF в сыворотке большая часть (91%) EGFR остается в более диффузном состоянии ( D = 0,25 мкм 2 s -1 ), и только 9% были обнаружены при менее диффузное состояние ( D = 0.12 мкм 2 с −1 , N = 85). Мы наблюдали большой сдвиг (84%, t -тест, P <0,01, N > 80) популяции в сторону менее диффузного состояния при добавлении 16 нМ EGF. Результаты показывают, что константа диффузии молекул EGFR уменьшается почти вдвое при добавлении EGF.
Анализ фотообесцвечивания пятен GFP-EGFR в клетках COS7 выявил стехиометрию комплексов EGFR (рис. 4d). В отсутствие EGF 91% флуоресцентных пятен ( N = 35) демонстрировали одностадийное фотообесцвечивание, что указывает на то, что они представляют собой мономеры GFP-EGFR.В присутствии EGF мы наблюдали, что 57% пятен ( N = 40) обесцвечиваются в два этапа, что позволяет предположить, что EGFR образует димер, содержащий два GFP на пятно (рис. 4e). Средняя интенсивность пятен, обесцвеченных в два этапа, была почти вдвое выше (в 2,1 раза выше без EGF и в 1,8 раза выше с EGF) по сравнению с пятнами, которые обесцвечивались за один этап. Кроме того, пятна, которые обесцвечивались в два этапа, рассеивались медленнее ( D = 0,13 ± 0,04 мкм 2 с -1 , стандартное отклонение) по сравнению с пятнами только с одним флуорофором ( D = 0.21 ± 0,07 мкм 2 с -1 ; t -тест, P = 0,0036; Рис. 4f), что согласуется с двухуровневым распределением гистограмм константы диффузии (Рис. 4c). Этот результат дополнительно указывает на то, что более диффузионные частицы в основном являются мономерами, а менее диффузионные частицы в основном являются димерами и олигомерами более высокого порядка 24 . Следует отметить, что процент молекул, которые демонстрируют двухступенчатое отбеливание (53%), не так высок, как процент молекул в менее диффузионном состоянии (84%) в 16 нМ EGF.Отдельные шаги частично связаны с преждевременным обесцвечиванием, когда флуоресцентные пятна проходят около ворот; обратимая димеризация и мембранная диссоциация EGFR 25 и ограниченное временное разрешение для обнаружения нескольких стадий. Учитывая, что ~ 20% молекул GFP остаются в темном состоянии из-за неправильного свертывания или неполного созревания 26 , мы оценили вероятность наблюдения события двухступенчатого обесцвечивания для димера ~ 50% в этих условиях, что согласуется с нашими наблюдение.
Сравнение PhotoGate и TOCCSL с помощью компьютерного моделирования
Успех эксперимента PhotoGate зависит от большого количества параметров, некоторые из которых могут контролироваться пользователем (то есть размеры области интереса, интенсивность лазера и частота стробирования), а другие — неотъемлемые. к данной биологической системе (то есть плотности флуорофора, константе диффузии и состоянию олигомеризации).Мы реализовали компьютерное моделирование эксперимента PhotoGate для оптимизации условий визуализации для SPT. Плотно скученным (50 мкм -2 ) флуоресцентным частицам, испускающим в среднем 5 × 10 5 фотонов до фотообесцвечивания, позволяли диффундировать на двумерной (2D) решетке, представляющей нижнюю поверхность клетки. Поток фотонов возбужденных флуорофоров был установлен равным 2000 с -1 . Фотообесцвечивание отдельных пятен рассчитывалось для каждого кадра моделирования с помощью алгоритма Монте-Карло (дополнительные таблицы 1–3; методы).Траектории SPT были построены для флуоресцентных частиц, которые находились на расстоянии не менее 0,5 мкм от любого другого неотбеленного флуорофора.
Используя параметры, которые представляют наши экспериментальные условия, моделирование показало, что PhotoGate превосходит TOCCSL по количеству используемых траекторий, которые могут быть получены из одной ячейки, продолжительности траекторий и способности определять олигомерное состояние молекул. . Для димерных частиц с постоянной диффузии 0.1 мкм 2 с −1 , наличие затвора 0,5 Гц по периметру области интереса диаметром 14 мкм привело к среднему времени отслеживания SPT 0,83 ± 0,02 с (среднее ± среднеквадратичное), что в четыре раза больше, чем 0,192 ± 0,002 с (среднее ± среднеквадратичное), достижимое с помощью TOCCSL (рис. 5a). Важно отметить, что хотя большинство траекторий в обоих экспериментах короткие, распределение времени отслеживания в эксперименте PhotoGate включает широкое плечо частиц, которые можно отслеживать в течение длительных периодов времени. С помощью PhotoGate можно отслеживать 120 ± 11 частиц на ячейку в течение более 3 с (среднее значение ± с.d., N = 10 100 траекторий из пяти ячеек), по сравнению с 7 ± 11 в эквивалентном эксперименте TOCCSL (среднее ± стандартное отклонение, N = 23 468 траекторий из пяти ячеек). Такое различие в величине длинных траекторий SPT связано с тем, что ROI в эксперименте TOCCSL переполняется за дифракционный предел в течение нескольких секунд после начала эксперимента. Разница в долгосрочном отслеживании становится еще более заметной при рассмотрении более быстро диффундирующих флуорофоров с D = 0.5 мкм 2 с −1 . Использование PhotoGate с частотой 3 Гц дает 25 ± 17 траекторий слежения более 5 с на ячейку (среднее ± стандартное отклонение, N = 4 173 траектории из пяти ячеек), тогда как такие длинные траектории не наблюдались без ворот (0 из 4 173 траекторий из пять ячеек; рис. 5а). Среднее время отслеживания SPT остается выше в эксперименте PhotoGate для быстро диффундирующих частиц: 0,746 ± 0,024 с по сравнению с 0,145 ± 0,002 с (среднее ± среднеквадратичное отклонение) без затвора. В остальной части сравнительного анализа PhotoGate и TOCCSL мы сосредоточились на флуорофорах, диффундирующих при 0.1 мкм 2 с −1 , поскольку TOCCSL не создает достаточных траекторий SPT для молекул, диффундирующих быстрее, чем 0,5 мкм 2 с −1 . Более длинные траектории слежения, доступные для PhotoGate, могут существенно повысить точность и надежность анализа диффузии, особенно в условиях, когда мембрана измеримо неоднородна и одна частица может испытывать локальные события локального удержания в течение одной траектории.
Рисунок 5: Численное моделирование эксперимента PhotoGate и сравнение с TOCCSL.( a ) Длительности траекторий одиночных частиц с D = 0,1 мкм 2 с −1 с частотой стробирования 0,5 Гц (слева) и траектории частиц с D = 0,5 мкм 2 с -1 с частотой стробирования 3 Гц (справа) в смоделированном эксперименте PhotoGate по сравнению с эквивалентными экспериментами TOCCSL. ( b ) Число траекторий отдельных частиц димерной молекулы с D = 0,1 мкм 2 s -1 , показывающих одно- и двухступенчатые события обесцвечивания в течение 80-секундного эксперимента в одном ячейка (среднее ± с.г). ( c ) Плотность флуорофора в ROI диаметром 14 мкм в ходе экспериментов PhotoGate (слева) и TOCCSL (справа) как функция потока фотонов одного флуорофора в секунду. ( d ) Плотность флуорофоров внутри 14 мкм ROI в типичных экспериментах TOCCSL и PhotoGate (частота стробирования 0,5 Гц и 1500 фотонов в секунду). ( e ) Плотность флуорофоров внутри ROI эксперимента PhotoGate через 30 секунд после начального обесцвечивания как функция частоты стробирования.Данные представлены для флуорофоров с константами диффузии 1 и 0,1 мкм 2 s -1 . ( f ) Плотность флуорофора в ходе экспериментов PhotoGate (слева) и TOCCSL (справа) в зависимости от радиуса области интереса. Черная стрелка на шкале интенсивности и пунктирные линии на тепловых картах указывают приблизительный предел обнаружения одиночной молекулы (1 флуоресцентное пятно мкм −2 ). Во всех моделированиях среднее количество фотонов, обнаруженных на флуорофор до фотообесцвечивания, составляет 5 × 10 5 фотонов, а поверхностная плотность флуоресцентных пятен составляет 50 мкм –2 в начале моделирования.См. Дополнительные таблицы 1–3 для получения подробного списка параметров моделирования.
Затем количество шагов фотообесцвечивания было определено по уникальным траекториям слежения. Мы обнаружили, что 31% димерных флуорофоров демонстрируют два этапа обесцвечивания за одну непрерывную траекторию слежения с помощью PhotoGate, по сравнению с 12% в эквивалентном моделировании TOCCSL. При этом общее количество просвечивающих траекторий за два шага составило 87,3 ± 7,1 на ячейку в PhotoGate, тогда как всего 11.4-4,4 траектории были получены с использованием TOCCSL (рис. 5б). Взятые вместе, эти данные демонстрируют, что PhotoGate значительно лучше подходит для определения стехиометрии комплекса с помощью фотообесцвечивания, чем TOCCSL, так как большее количество диффундирующих комплексов можно отслеживать на клетку, а большая часть отслеживаемых комплексов отбеливается в несколько этапов.
Затем мы проверили, как на плотность флуорофора внутри области интереса влияет интенсивность освещения TIRF. Мы провели моделирование, изменив поток флуорофоров от 0 до 12 × 10 3 фотонов в секунду, и рассчитали плотность флуорофоров в пределах области интереса в течение 80 секунд.В смоделированном эксперименте PhotoGate при частоте затвора 0,5 Гц и диаметре ROI 14 мкм с димерными флуорофорами, диффундирующими на 0,1 мкм 2 s -1 , плотность флуорофоров быстро выросла до ~ 1 мкм -2 после начального цикла отбеливания оставался на этом уровне более минуты (рис. 5c; дополнительный фильм 10) почти независимо от потока фотонов. В отсутствие затвора почти все интенсивности освещения TIRF приводили к быстрому потоку небеленых флуорофоров в ROI, быстро обходя плотность, необходимую для обнаружения одиночных молекул (рис.5d; Дополнительный фильм 11). Увеличение интенсивности освещения в TOCCSL немного увеличивает среднее время SPT, но также приводит к быстрому фотообесцвечиванию молекул за пределами ROI. Это помогает объяснить, почему с помощью PhotoGate можно достичь более длинных траекторий слежения (рис. 5a). В отсутствие заслонки плотность флуорофоров быстро увеличивается после отбеливания, так что остается возможным лишь кратковременное наблюдение за отдельными молекулами.
Для заданной плотности флуорофора и постоянной диффузии мы исследовали влияние частоты затвора и радиуса обесцвечивания на плотность неотбеленных флуорофоров внутри области интереса.Например, стробирования 0,5 Гц достаточно, чтобы довести плотность диффундирующих флуорофоров на 0,1 мкм 2 с -1 ниже предела обнаружения, но требуется ~ 3 Гц для достижения того же значения для быстрее диффундирующих частиц с D = 1 мкм 2 с −1 (рис. 5д). Когда частота стробирования поддерживается постоянной на уровне 0,5 Гц, меньшая область интереса приводит к большей эффективной плотности флуорофора в области интереса (рис. 5f). В отличие от TOCCSL, типичный эксперимент PhotoGate быстро достигает установившегося состояния, в котором поток неотбеленных молекул в ROI почти уравновешивается совместным фотообесцвечиванием пучком TIRF и пучком затвора (рис.